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《食用菌中凝集素的測定 高效液相色譜法》國家標(biāo)準(zhǔn)征求意見

2021-10-15 08:46:44 來源：儀表網(wǎng) 閱讀量：7615

　　根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會國家標(biāo)準(zhǔn)制修訂計劃，由中國標(biāo)準(zhǔn)化研究院提出并歸口的《食用菌中凝集素的測定 高效液相色譜法》(計劃號：20202637-T-424)國家標(biāo)準(zhǔn)現(xiàn)已形成征求意見稿射疤，按照《國家標(biāo)準(zhǔn)管理辦法》的有關(guān)規(guī)定符殊，現(xiàn)向社會各界公開征求意見。
 
　　目前倾桩，食用菌是一種富含多種活性成分的優(yōu)良蔬菜倘秸，我國是世界食用菌生產(chǎn)第一大國，目前食用菌產(chǎn)量占全球總產(chǎn)量的75%以上眼骗，2014年轨皮，全國食用菌產(chǎn)量已超過3000萬噸。食用菌產(chǎn)品出口126個國家和地區(qū)方秤，食用菌出口量約占亞洲出口總量的80%燎厘，占全球貿(mào)易量的40%。食用菌總產(chǎn)值在我國種植業(yè)中的排名，僅次于糧、棉犀概、油西练、菜、果缤币，居第六位茵休。食用菌產(chǎn)業(yè)已成為我國種植業(yè)的一項新興的支柱產(chǎn)業(yè)和新的經(jīng)濟增長點赛惩。其中2011年躏碳，我國食用菌產(chǎn)值已超過1400億元搞旭，出口創(chuàng)匯達(dá)24.07億美元。
 
　　食用菌產(chǎn)品主要以鮮銷菇绵、干制肄渗、鹽漬、速凍等方式為主咬最，在其加工生產(chǎn)過程中會產(chǎn)生大量的廢棄物翎嫡，主要有菌腳、菇片永乌、菌柄基部等惑申。這些廢棄物難以食用或商品價值低，開發(fā)利用率極低翅雏，多限于在動物飼料和有機肥中使用镇纳，因此對食用菌加工廢棄物中的主要活性成分進(jìn)行深入研究，制定相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)是企業(yè)快速發(fā)展和進(jìn)行產(chǎn)品質(zhì)量控制的需要咒娶。
 
　　凝集素的檢測方法在國內(nèi)外還沒有統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)仍枕，因此急需建立一套科學(xué)合理的凝集素檢測體系，為凝集素產(chǎn)品研發(fā)及食用菌綜合開發(fā)利用提供依據(jù)吗罪，進(jìn)而引導(dǎo)生產(chǎn)尚蔗，規(guī)范市場。所以付昧，本標(biāo)準(zhǔn)的制定也是完善食用菌及其加工產(chǎn)品檢測方法國家標(biāo)準(zhǔn)的需要御欢。
 
　　高效液相色譜(HPLC)是目前能夠快速分析凝集素的重要技術(shù)手段，可以結(jié)合超濾严齿、離子交換層析升碱、分子排阻層析以及親和層析等技術(shù)，從而獲得高純度的凝集素骄闺，提高了純化的效率是酣。
 
　　本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了基于高效液相色譜法的食用菌中凝集素的測定方法的范圍、規(guī)范性引用文件剃袍、原理黄刚、試劑和材料、儀器和設(shè)備民效、食用菌中凝集素的測定方法憔维、結(jié)果計算與表示、精密度畏邢。
 
　　本標(biāo)準(zhǔn)的主體內(nèi)容包括：范圍业扒、規(guī)范性引用文件检吆、原理、試劑程储、儀器和設(shè)備蹭沛、測定步驟、空白試驗章鲤、結(jié)果計算與表示摊灭、精密度和回收率、檢出限败徊、檢驗報告等帚呼。
 
　　方法原理：
 
　　試樣中菌菇凝集素經(jīng)硫酸銨沉淀、超濾富集后虫喝，高效液相色譜法測定肮插，以保留時間定性，外標(biāo)法定量俊揣。
 
　　儀器和設(shè)備：
 
　　1.高效液相色譜儀：配紫外檢測器。2.超聲波振蕩器朱泞。3.分析天平乐太，感量 0.01g 和 0.0001g。4.離心機膀琐，5000 r/min 以上莉孽。5. 破壁機。6.超濾離心管：50 mL苦旋，10 kd火晕。7.容量瓶：5 mL。8.燒杯：50 mL偏秦，500 mL液珠。9.凝膠色譜柱，TSKgel G2000SWXL辅甥，7.8 mm I.D.×30 cm酝润，5 μm，或相當(dāng)規(guī)格色譜柱璃弄。10.針式微孔過濾器：0.22 um要销，直徑 13 mm 的聚四氟乙烯(PTFE)濾膜或者相當(dāng)者。11.離心管：50 mL夏块。
 
　　凝集素提仁韪馈：
 
　　鮮樣：
 
　　取處理好的鮮樣 50 g 于破壁機中，加入 1:30 的磷酸鹽提取液勻漿脐供，勻漿完成后放入 500 mL 燒杯中浑塞，在超聲波振蕩器中超聲 30 min茁肠，超聲完成后在 4℃冰箱中放置 4 h。放置混勻后稱取 20 g 勻漿以 8000r/min 的轉(zhuǎn)速離心 20 min缩举，離心完成后用濾紙過濾垦梆，取過濾后的濾液 5 g 放入燒杯中，加入 5 g 30%的硫酸銨溶液仅孩，并用超濾離心管以 8000 r/min 的轉(zhuǎn)速離心 15 min 超濾 6 次托猩，將超濾之后的上清液轉(zhuǎn)入 5 mL容量瓶中，用水定容责名，過 0.22 um 的水系針式濾膜溶迹，以供液相檢測使用。
 
　　干樣：
 
　　取處理好的干樣1 g于燒杯中液炼，加入1:45的磷酸鹽提取液在超聲波振蕩器中超聲30 min剩织，超聲完成后在4℃冰箱放置 4h。放置混勻后稱取20 g以8000 r/min的轉(zhuǎn)速離心20 min枕络，離心完成后用濾紙過濾硬拴，取過濾后的濾液 2g放入燒杯中，加入10 g 30%的硫酸銨溶液搜澈，并用超濾離心管以8000 r/min的轉(zhuǎn)速離心15 min超濾6次魁济，將超濾之后的上清液轉(zhuǎn)入5毫升容量瓶中，用水定容乏傀，過0.22 μm的水系針式濾膜孙已，以供液相檢測使用。
 
　　本標(biāo)準(zhǔn)適用于食用菌中凝集素的測定杆坪。
 

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