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《海參中海參多糖的測定 高效液相色譜法》國家標(biāo)準(zhǔn)征求意見

2021-10-15 08:54:37 來源：儀表網(wǎng) 閱讀量：8108

　　根據(jù)國家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會國家標(biāo)準(zhǔn)制修訂計劃姨桩，由中國標(biāo)準(zhǔn)化研究院提出并歸口的《海參中海參多糖的測定 高效液相色譜法》(計劃號：20205073-T-424)國家標(biāo)準(zhǔn)現(xiàn)已形成征求意見稿跛庶，按照《國家標(biāo)準(zhǔn)管理辦法》的有關(guān)規(guī)定，現(xiàn)向社會各界公開征求意見戚促。
 
　　海參(sea cucumber)质凰，屬棘皮動物門(Echinodermata)，海參綱(Holothurioider)睡誉，是棘皮動物中經(jīng)濟價值最大的一綱畏琢。海參約有 1100 多種，我國有 100 多種伤很，可供食用的有 20多種虐欲，其中以仿刺參的品質(zhì)和口感最佳。海參含有蛋白質(zhì)肺樟、多糖檐春、微量元素和維生素等多種營養(yǎng)物質(zhì)，已經(jīng)作為功能食品而被引起關(guān)注么伯。更重要的是疟暖，它們含有大量的生物活性物質(zhì)如海參皂甙、粘多糖和膠原蛋白等蹦狂，具有潛在的醫(yī)藥應(yīng)用價值誓篱。
 
　　海參多糖作為主要的活性成分，其含量對其食用及藥用價值影響很大凯楔，是不可或缺的海參營養(yǎng)評價指標(biāo)窜骄。海參中多糖類化合物結(jié)構(gòu)復(fù)雜，且因海參種類和生長環(huán)境的不同而有差別摆屯。不同種類海參中的多糖結(jié)構(gòu)不同邻遏，而不同產(chǎn)地的同種海參中海參巖藻聚糖硫酸酯(SC-FUC)和海參硫酸軟骨素(SC-CHS)的含量也不盡相同。另外虐骑，海參中蛋白質(zhì)准验、多糖、脂肪疆虑、微量元素等復(fù)雜成分的存在躏叽，會給海參多糖的測定帶來很多困難，采用簡單的分光光度法或稱重法很難滿足以海參多糖為評價指標(biāo)建立海參制品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的要求澄月。因此淹佃，制訂簡單可信的海參多糖的檢測方法標(biāo)準(zhǔn)具有十分重要的現(xiàn)實意義和緊迫性。
 
　　本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了海參及以海參為原料加工而成的干海參脂惊、即食海參旁囤、膠囊悟肉、漿液等深加工制品中海參多糖含量的高效液相色譜測定方法的范圍、規(guī)范性引用文件缭越、原理乞挥、試劑和材料、儀器和設(shè)備秋鹅、結(jié)果計算與表示赤巢、精密度。
 
　　本標(biāo)準(zhǔn)適用于海參及以海參為原料加工而成的干海參刀昼、即食海參嗓奢、膠囊讼撒、漿液等深加工制品中海參多糖含量的測定浑厚。
 
　　下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件不可少的條款。其中根盒，注日期的引用文件钳幅，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件炎滞，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件敢艰。GB/T 6682 分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法；GB/T 8855 水果和蔬菜 取樣方法册赛。
 
　　方法原理：
 
　　樣品經(jīng)酶解钠导、乙酸鉀沉淀、酸解后制備得到海參硫酸軟骨素水解液森瘪，水解液中巖藻糖與 1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)進(jìn)行衍生反應(yīng)牡属，XDB-C18 色譜柱分離，經(jīng)配有紫外檢測器的高效液相色譜儀測定巖藻糖衍生物的含量扼睬，內(nèi)標(biāo)法定量逮栅，以巖藻糖含量為基準(zhǔn)計算出樣品中海參多糖的含量。
 
　　儀器和設(shè)備：
 
　　1.高效液相色譜儀：配紫外檢測器补搅。2.天平：感量0.01g安蔚。3.分析天平：感量0.0001g。4.離心機：15000 r/min舱闪。5.電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱眼栽。6.超聲波清洗儀。7.渦旋混合器阶务。8.恒溫水浴鍋贸渐。9.恒溫水浴振蕩器。10.氮吹儀说庶。11.pH 計缓鞠。12.微量移量移液槍及配套槍頭檩渐。13.小型粉碎機。
 
　　測定步驟：
 
　　樣品的前處理：
 
　　鮮海參去腸腺业抵、灰嘴剃拇，剪成 0.5 cm×0.5 cm 的小塊，70 ℃烘干 12 h厦碎，粉碎害淤，過10目篩，混勻備用拓售；干海參窥摄，粉碎，過 10 目篩础淤，混勻備用崭放；即食海參，剪成 0.5cm×0.5cm 的小塊鸽凶，70 ℃烘干 12 h币砂，粉碎，過 10 目篩玻侥，混勻備用决摧；膠囊，取內(nèi)容物混勻備用凑兰；漿液掌桩，混勻備。
 
　　結(jié)果表示：
 
　　測定結(jié)果以平均測定的算術(shù)平均值表示姑食，計算結(jié)果保留兩位有效數(shù)字波岛。兩次平行測定結(jié)果的相對平均偏差不應(yīng)超過10%。
 
　　本標(biāo)準(zhǔn)方法的優(yōu)點在于：
 
　　(1)靈敏度高共悼，巖藻糖衍生物在 254 nm 有很強的吸收驶闰，濃度為8.0×10-4 mg/mL 時即可實現(xiàn)定量檢測。(2)穩(wěn)定性好钙瘫，24 小時內(nèi)巖藻糖衍生物峰面積穩(wěn)定阔垢，RSD≤5%。(3)分離效果好侯砸，在此高效液相色譜條件下挨奶，巖藻糖能夠與其它單糖明顯分離，有效避免其它單糖對巖藻糖的檢測帶來的干擾俗衍，實現(xiàn)準(zhǔn)確定量粥萍。(4)適用范圍較廣，可應(yīng)用于固態(tài)簸隅、液態(tài)等多種刺參制品中海參多糖含量的測定犀挠。(5)本方法能有效排除市場上向刺參制品中摻入其它來源多糖而干擾海參多糖準(zhǔn)確定量的問題易解。
 

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