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恒溫培養(yǎng)箱在微生物檢測(cè)中的應(yīng)用

來(lái)源:上海柏欣儀器設(shè)備廠   2024年12月23日 07:09   28
  常規(guī)菌檢測(cè)的目的是一種指示菌,一般以CFU/ML來(lái)計(jì)量椭豫,比如總菌數(shù)和大腸菌群耻瑟,這兩個(gè)一般是用來(lái)評(píng)價(jià)食品被污染的程度,因?yàn)榘闯@硗鹧常覀兩町?dāng)中接觸的致病菌還是相對(duì)較少的溃墨,而且人體本身也具有免疫功能,所以如果這兩個(gè)指示菌如果不超標(biāo)的話希镶,我們就有理由相信該食品是相對(duì)安全的擂益,注意:不是安全。
  
  傳統(tǒng)的檢測(cè)方法也很簡(jiǎn)單欲返,一般就是培養(yǎng)富集后計(jì)數(shù)翻妆,其大致流程是這樣:^_^)
  
  1)取樣,一般都是取25g樣品加入到225ml的生理鹽水中欧纬,取樣方法會(huì)根據(jù)樣品不同有所不同践拐。比如肉制品,可以用剪刀剪碎祭啸。
  
  2)計(jì)數(shù)鹿逞,找一個(gè)比較容易計(jì)數(shù)的梯度進(jìn)行計(jì)數(shù),然后根據(jù)稀釋倍數(shù)反推出樣品中的微生物俐逛,計(jì)數(shù)說(shuō)簡(jiǎn)單點(diǎn)就是數(shù)菌落的數(shù)量乙淡,如果你涂抹夠開(kāi)的話,每個(gè)培養(yǎng)前的微生物會(huì)長(zhǎng)成一個(gè)菌落需纳,所以個(gè)1個(gè)菌落就代表1個(gè)培養(yǎng)前的微生物芦倒。(說(shuō)到這,我就想起我以前老是想不翩,一個(gè)菌落是由很多個(gè)微生物組成的兵扬,光數(shù)菌落怎么會(huì)得出樣品中微生物的個(gè)數(shù)呢?這就是沒(méi)有考慮培養(yǎng)前與培養(yǎng)后的變化口蝠。
  
  3)稀釋器钟,一般來(lái)說(shuō)稀釋3個(gè)梯度,10倍妙蔗,100倍傲霸,1000倍,而且每個(gè)稀釋梯度要倒兩個(gè)平板眉反。
  
  4)均質(zhì)昙啄,要保證均質(zhì)的力度不能太大,如果太大有可能損害樣品中的微生物寸五,有些檢驗(yàn)人員可能就是用手捏一捏梳凛,甩一甩聘楞,也有用拍擊式均質(zhì)器的
  
  5)培養(yǎng),把事先準(zhǔn)備好的培養(yǎng)基(培養(yǎng)基的制備旷吱,一般要經(jīng)過(guò)配比虑涣,高壓滅菌等過(guò)程,當(dāng)然也有配制好的商業(yè)培養(yǎng)基舰范,進(jìn)口的有MERCK坪逃,國(guó)產(chǎn)的也很多,比如陸橋)倒平板冤兄,然后劃線培養(yǎng)或者涂抹均勻即可咬钝,只要保證盡量把含菌的稀釋液涂抹開(kāi),不要有菌落重疊的現(xiàn)象沮汇,然后放入恒溫培養(yǎng)箱的進(jìn)行培養(yǎng)盈械,培養(yǎng)溫度與所檢測(cè)微生物不同而不同,比如大腸菌群是37度妻诚,糞大腸菌群要略高一點(diǎn)案贩,具體多少,我也記得不是很清楚了
  
  常規(guī)菌大概就是這樣啦愤厦,目前大多數(shù)檢驗(yàn)單位都在使用這種傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法攒庵,其優(yōu)點(diǎn)就是便宜,廉價(jià)败晴,但是比較慢浓冒,如今市面上有很多總菌數(shù)和大腸菌群的快速商業(yè)方法,比如3M尖坤,他們?cè)诩埰咸峁┈F(xiàn)成的培養(yǎng)基稳懒,只需把稀釋液直接接種到培養(yǎng)基即可,相比較而言慢味,節(jié)省了我們制備培養(yǎng)基的時(shí)間场梆,不過(guò)貌似在培養(yǎng)時(shí)間上并沒(méi)有縮短。還有檢測(cè)培養(yǎng)基電導(dǎo)率方法來(lái)檢測(cè)的纯路,因?yàn)榕囵B(yǎng)前或油,培養(yǎng)基都是大分子物質(zhì),這些物質(zhì)的電導(dǎo)率相對(duì)較低驰唬,經(jīng)過(guò)微生物代謝后顶岸,被分解為小分子物質(zhì),所以電導(dǎo)率急劇增加叫编,通過(guò)建一個(gè)曲線來(lái)反推微生物的個(gè)數(shù)拿酱。
  
  致病菌的檢測(cè)是不得檢出的,所以要比常規(guī)菌要復(fù)雜,所耗時(shí)間更長(zhǎng)企恢,有可能還需要用沒(méi)有選擇性的培養(yǎng)基進(jìn)行前增菌您眉,然后再用選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行增菌,如果有可疑菌落再挑取利用生化反應(yīng)進(jìn)行鑒定涡趟。
  
  比如沙門氏菌,檢測(cè)流程大致如下:
  
  1)取樣涯翠,同常規(guī)菌
  
  2)均質(zhì)呼泪,同常規(guī)菌
  
  3)前增菌,先要用無(wú)選擇性的培養(yǎng)基進(jìn)行富集增菌憔吉,因?yàn)橛锌赡軜悠分兴纳抽T氏菌受傷宗窗,或較少,直接用選擇性培養(yǎng)基培養(yǎng)的話肿讽,沙門氏菌不會(huì)生長(zhǎng)蛮埋,從而出現(xiàn)假陰性。
  
  4)增菌找田,用選擇性的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)歌憨,這樣大部分的微生物在選擇性的培養(yǎng)基上都不會(huì)生長(zhǎng),就如同過(guò)濾一樣墩衙,如果長(zhǎng)菌务嫡,根據(jù)菌落形態(tài)學(xué)來(lái)判斷到底是否為可疑菌落,如果沒(méi)有可疑菌落漆改,可以判定為陰性心铃,如果有,挑取并做生化反應(yīng)鑒定是否是真的沙門氏菌
  
  5)做生化反應(yīng)進(jìn)行鑒定挫剑,這里就不說(shuō)了去扣,我也不太清楚,就知道有這個(gè)流程樊破。
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