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菌落總數(shù)測試片檢測方法

1 適用范圍：可用于各類食品及原料中菌落總數(shù)的測定许食。也可用于與食品接觸的容器、操作臺和其他設(shè)備表面的衛(wèi)生檢測挽饺。
2 方法原理：將營養(yǎng)培養(yǎng)基够菊、凝膠和氯化三苯基四氮唑（TTC）顯色劑等加載在試紙片，經(jīng)加樣恨溜、培養(yǎng)后符衔，細(xì)菌菌落在測試片上顯現(xiàn)出紅色菌斑乌骇，通過計數(shù)報告結(jié)果防蚓。
3 操作方法
3.1樣品處理：無菌稱取樣品25g（或25mL）放入含有225mL無菌生理鹽水的采樣瓶或均質(zhì)杯內(nèi)，經(jīng)充分振搖（均質(zhì)）做成1:10的稀釋液旺垒。用1mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1mL项戴，注入含有9mL滅菌生理鹽水的試管內(nèi)形帮，用1mL滅菌吸管反復(fù)吸吹制成1:100的稀釋液。以此類推周叮，做出1:1000等稀釋度的稀釋液辩撑，每個稀釋度更換一支滅菌吸管。
3.2接種：一般食品選2～3個稀釋度進(jìn)行檢測，含菌量少的液體樣品（如食用純水和礦泉水等）可直接用原液檢測合冀。將測試片放在水平臺面上各薇，揭開上面的透明薄膜，用滅菌吸管吸取樣品原液或稀釋液1mL君躺，均勻加到中央的紙片上峭判，輕輕將上蓋膜放下，靜置5 min使培養(yǎng)基凝固现熔，zui后用手輕輕地壓一下服骚。每個稀釋度接種兩片。
3.3培 養(yǎng)： 將測試片疊在一起放回原自封袋中展霸，透明面朝上水平置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)蝎蛤，堆疊片數(shù)不超過12片。培養(yǎng)溫度為36℃±1℃莺肌，培養(yǎng)15～24h挪吱。
4 結(jié)果判斷與計數(shù)：
4.1細(xì)菌在紙片上生長后會顯示紅色斑點，選擇菌落數(shù)適中（10個～100個）的紙片進(jìn)行計數(shù)辈喜，乘以稀釋倍數(shù)后即為每克（或毫升）樣品中所含的細(xì)菌菌落總數(shù)捺柬。菌落數(shù)在100以內(nèi)時，按實有數(shù)報告砖伴。大于100時望泪，用二位有效數(shù)字，二位有效數(shù)字后面的數(shù)字愧汽，以四舍五入方法計算宾芥，并以10的指數(shù)來表示。
4.2計數(shù)原則與報告方式
4.2.1 通常選擇菌落在10個～100個之間的紙片進(jìn)行計數(shù)横朋，乘以稀釋倍數(shù)報告之（見下表中例次1）仑乌。國家標(biāo)準(zhǔn)菌落總數(shù)報告方式術(shù)語為cfu/g或mL，cfu的含義為菌落形成單位琴锭。
4.2.2 若有兩個稀釋度的菌落數(shù)在10個～100個之內(nèi)晰甚，兩者的比值小于2，則取其平均數(shù)决帖，若大于2厕九，則采用稀釋度小者報告（見下表中例次2和例次3）。
4.2.3 若三個稀釋度的菌落數(shù)都有在10個～100個之內(nèi)時地回，應(yīng)選擇二個低數(shù)值的平均數(shù)（見下表中例次4）止剖。
4.2.4 若三個稀釋度的菌落數(shù)均小于10個或大于100個時，應(yīng)重新試用更低或更高的稀釋度進(jìn)行菌落計數(shù)落君；或采用均小于數(shù)量標(biāo)準(zhǔn)的zui小值穿香，或采用均大于數(shù)量標(biāo)準(zhǔn)的zui大值（見下表中例次5和例次6）。

 
5 表面取樣方法：加1mL滅菌生理鹽水在測試片上焙蚓，靜置至少1h使培養(yǎng)基凝固；提起上層膜裸岁，使中央濾紙部分貼到待測物表面届辽，用手在外側(cè)輕壓；然后將上蓋膜合上郊啄，置培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)映贞。
6 注意事項：使用過的紙片上帶有活菌，需及時按照生物安全廢棄物處理原則進(jìn)行處理寄菲。
 
  
菌落數(shù)少時的情況                             菌落數(shù)多時的情況