Qiagen Plasmid Midi Kit質(zhì)粒純化試劑盒12143/12145

轉(zhuǎn)染效率與質(zhì)粒純化方法。

采用不同方法制備pRSVcat DNA荡将，通過(guò)脂質(zhì)體介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染將其導(dǎo)入的細(xì)胞系內(nèi)绿语，40小時(shí)后測(cè)定CAT表達(dá)水平得滤，確定轉(zhuǎn)染效率衣式。每個(gè)柱形代表4個(gè)獨(dú)立的轉(zhuǎn)錄的平均值（2個(gè)質(zhì)粒制備物分別轉(zhuǎn)染2次）着茸。使用QIAGEN Plasmid Kit可獲得zui高的轉(zhuǎn)染效率。

Qiagen Plasmid Midi Kit質(zhì)粒純化試劑盒12143/12145

性能

QIAGEN Plasmid Kit利用重力流QIAGEN陰離子交換柱技術(shù)高效純化質(zhì)粒DNA樟澜。產(chǎn)量可達(dá)10 mg（Giga）误窖、2.5 mg（Mega）叮盘、500 µg（Maxi）秩贰、或100 µg（Midi）高拷貝質(zhì)粒DNA（培養(yǎng)體積取決于質(zhì)粒拷貝數(shù)柔吼、插入片段大小毒费、宿主菌株和培養(yǎng)基。）QIAGEN Plasmid Kits純化的質(zhì)粒DNA適合多種應(yīng)用愈魏，如：轉(zhuǎn)染（參見(jiàn)"Transfection efficiency versus plasmid purification method"）觅玻、克隆和體外轉(zhuǎn)錄。

原理

QIAGEN-tips內(nèi)*的陰離子交換樹(shù)脂專(zhuān)為純化核酸設(shè)計(jì)培漏。它*的分離特性溪厘，使純化的DNA的純度相當(dāng)于連續(xù)2次CsCl梯度離心得到的DNA純度。預(yù)裝的QIAGEN-tips利用重力流原理工作牌柄，縮短了純化質(zhì)粒的手動(dòng)操作時(shí)間畸悬。整套QIAGEN質(zhì)粒純化體系避免*、氯FANG粥蜘、溴化乙錠和CsCl等有毒物質(zhì)蒂拯，減小對(duì)使用者和環(huán)境的危害。

操作流程

使用QIAGEN Plasmid Kits渔缅，細(xì)菌裂解物通過(guò)離心澄清任肯。澄清后的裂解物上樣到陰離子交換柱，質(zhì)粒DNA在適當(dāng)?shù)牡望}條件和pH條件下與樹(shù)脂進(jìn)行選擇性結(jié)合演湘。RNA绿窿、蛋白質(zhì)、代謝產(chǎn)物和和其它低分子量雜質(zhì)用中鹽洗滌液去除窃裙，用高鹽緩沖液洗脫純質(zhì)粒DNA（參見(jiàn)"QIAGEN Plasmid Kit procedures"）搭照。得到的DNA用異丙醇沉淀濃縮和脫鹽后，離心收集。

應(yīng)用

QIAGEN Plasmid Kits純化質(zhì)粒DNA適合多種應(yīng)用凝估，如：

轉(zhuǎn)染

克隆

PCR

體外轉(zhuǎn)錄

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