農(nóng)藥殘留速測(cè)光度計(jì)通用酶試劑

蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘毒快速檢測(cè)

酶抑制率法（分光光度法）試劑  使用說(shuō)明

本試劑為國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)快速檢驗(yàn)方法GB/T5009.199-2003的配套試劑冻咆。酶活性和對(duì)農(nóng)藥的靈敏度指標(biāo)均達(dá)到或超過(guò)了國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)要求，可以在各種型號(hào)的農(nóng)藥殘毒檢測(cè)儀（分光光度法）上使用策哈，具有穩(wěn)定性好炮家、靈敏度高和使用方便等特點(diǎn)。

一泪缨、試劑配制

1. 緩沖液試劑：整包倒入大燒杯中媚瘫，加1000mL純凈水溶解，酸堿度為pH8.0虱忙，常溫保存逢痕；

2. 乙酰膽堿酯酶：取一支酶粉加20mL緩沖溶液溶解，4℃冰箱中保存狼楔，一周內(nèi)用完钳枕。也可將溶解后的酶液分成幾個(gè)小瓶，將其冷凍赏壹，用時(shí)融化鱼炒，但不能重復(fù)多次冷凍、化解蝌借。

3. 顯色劑：取一支顯色劑加入20mL緩沖溶液昔瞧，避光保存；

4. 底物：取一支底物加20mL緩沖溶液菩佑，搖勻后置4℃冰箱中保存自晰；

二凝化、分析步驟

1. 樣品處理：選取有代表性的蔬菜樣品，沖洗掉表面泥土缀磕，剪成1cm左右見(jiàn)方碎片缘圈，取樣品1g，（非葉菜類(lèi)取2g）放入燒杯或提取瓶中袜蚕，加入5mL緩沖溶液糟把，手搖振蕩1～2分鐘，或超聲波振蕩30秒鐘消弧，倒出提取液堡雁，靜置3~5min，待用室域。

2. 對(duì)照溶液測(cè)試： 先于試管中加入100微升酶液和100微升顯色劑淹疙，再加入2.5mL緩沖溶液，搖勻后于37°C放置15min杜域，加入100微升底物搖勻柴哈，此時(shí)檢液開(kāi)始顯色反應(yīng)，應(yīng)立即放入儀器比色池中唁谣，記錄初始吸光度A₁和反應(yīng)3 min時(shí)的吸光度A₂冶巴，A₂-A₁=DA₀。

3. 樣品溶液測(cè)試：先于試管中加入100微升酶液和100微升顯色劑溪惶，再加入2.5mL樣品提取液顺鸯，其它操作與對(duì)照溶液測(cè)試相同，記錄初始吸光度A₁和反應(yīng)3 min時(shí)的吸光度A₂终距，A₂-A₁=DA_t尊捞。

三、結(jié)果計(jì)算

結(jié)果以酶被抑制的程度（抑制率）表示宏怔。

抑制率（%）=[ （DA₀-DA_t）/ DA₀]×100 

當(dāng)蔬菜樣品提取液對(duì)酶的抑制率≥50%時(shí)奏路，表示蔬菜中有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥存在，樣品為陽(yáng)性結(jié)果臊诊。陽(yáng)性結(jié)果的樣品需要重復(fù)檢驗(yàn)2次以上思劳。

對(duì)陽(yáng)性結(jié)果的樣品，可用其它方法進(jìn)一步確定具體農(nóng)藥品種和含量妨猩。

四、注意

1. 每批樣品的控制時(shí)間秽褒、溫度條件必須與對(duì)照溶液的條件**壶硅。

2. 蔥、蒜销斟、蘿卜庐椒、韭菜椒舵、芹菜、香菜约谈、茭白笔宿、蘑菇及番茄汁液中，含有對(duì)酶有影響的植物次生物質(zhì)填篱，容易產(chǎn)生假陽(yáng)性徙掠。處理這類(lèi)樣品時(shí)，不要剪的太碎革陋。對(duì)一些含葉綠素較高的蔬菜乌窿，也不要剪的太碎。

3. 當(dāng)溫度條件低于37°C锦钓，酶反應(yīng)的速度隨之放慢庙炮，加入酶液和顯色劑后放置反應(yīng)的時(shí)間應(yīng)相對(duì)延長(zhǎng)，延長(zhǎng)時(shí)間的確定求驳，應(yīng)以膽堿酯酶對(duì)照溶液測(cè)試得到的吸光度A₂-A₁≥ 0.3以上种司，即可往下操作。當(dāng)對(duì)照溶液酶液的加入量大一些時(shí)粥谐，也可使A₂-A₁≥0.3以上娶得。

4. 當(dāng)吸光度大到無(wú)法讀取時(shí)，說(shuō)明測(cè)定液渾濁有干擾兑蹦。

五悬朱、產(chǎn)品有關(guān)技術(shù)指標(biāo)

1. 代表性農(nóng)藥的檢出下限見(jiàn)下表

2. 乙酰膽堿酯酶的活性：（室溫20°C以上進(jìn)行實(shí)驗(yàn)）DA₀≥0.3。

六脖母、包裝及保存條件

每包可做200份樣品士鸥，0°C以下冰箱冷凍保質(zhì)期為三年，配成試劑后保存期為一周谆级。